英国生物化学家桑格和库森等人创造的DNA测序法。即运用能在DNA模板链上互补参入却不能延伸的四种双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）与正常的四种脱氧核苷三磷酸（dNTP）发愤图强，组成的互补链可以在任何方位停止，取得犬牙交错的反响产品，通过电泳别离，从四条泳道上的条带次序就能读出DNA的序列。是现在DNA测序的首选办法。

  桑格-库森法是一种被大范围的运用的DNA测序技能，也是人类基因组计划运用的首要测序技能。1975年，英国生物化学家弗雷德里克·桑格和库森创造了该技能，桑格因而在1980年第2次取得诺贝尔化学奖。早在1958年，桑格就因破译胰岛素分子的氨基酸摆放次序取得过诺贝尔化学奖。

  桑格-库森法的根底原理是以待测DNA分子为模板，使用与待测DNA分子5′端特异性互补配对的引物，通过DNA聚合酶，进行体外DNA组成反响。每一次序列测定由4个独立的反响构成，每个反响系统中含有4种脱氧核苷三磷酸dNTP（dATP，dGTP，dTTP，dCTP）和1种双脱氧核苷三磷酸ddNTP（ddATP，ddGTP，ddTTP，ddCTP）作为底物。在DNA聚合酶的效果下，4种dNTP可以正常参加DNA新链的延伸。可是因为ddNTP缺少了3-OH基团，无法与相邻的dNTP构成磷酸二酯键，因而ddNTP加入到新组成的DNA链后会导致新链停止延伸。终究4个反响系统构成由一系列长度不同、且3′结尾都带有一个ddNTP的DNA新链所组成的反响产品混合物。然后再通过凝胶电泳，别离4个反响系统中含有各ddNTP的反响产品。因为反响产品中掺入DNA新链的各ddNTP的方位即为待测DNA分子中各dNTP所在的方位，并且依据反响产品的相对分子量越小，其掺入ddNTP的方位越接近待测DNA分子5′端的准则，就可以通过顺次读取凝胶中的各ddNTP，取得待测DNA分子的碱基摆放次序。

  跟着检测技能的开展和更新，桑格测序法又与荧光主动查验测验技能和毛细管电泳技能相结合。毛细管电泳技能的优势是使别离DNA分子的分辨率能到达一个碱基。在DNA组成反响中，将4种ddNTP符号4种不同的荧光基团，当带有荧光基团的DNA片段通过毛细管结尾的激光发射器时，荧光基团发射出特定波长的光，通过探测器和电脑转变为其所对应的核苷酸，即可直接读取DNA的碱基序列。这使DNA测序技能操作更快捷，并且准确度更高，运用也更广泛。回来搜狐，检查更加多