在做核酸琼脂糖凝胶电泳时，咱们常遇到「条带含糊、没有条带、条带拖尾」等状况。

  本文整理核酸电泳「常见问题-或许原因-解决方法」，供各位参阅！点击图片还可解锁规范试验 protocol，带你依照过程一步步筛查试验问题。

  1、琼脂糖：不同厂家、不同批号的琼脂糖，其杂质含量不同，影响 DNA 的搬迁及荧光布景的强度，应有挑选地运用。

  2、凝胶的制备：凝胶中所加缓冲液应与电泳槽中的相一致，熔化的凝胶应及时倒入板中，避免倒入前凝结结块。倒入板中的凝胶应避免气泡，避免影响电泳成果。

  3、电泳缓冲液：为坚持电泳所需的离子强度和 pH，应常常更新电泳缓冲液。

  4、样品参加量：正常的状况下，0.5 cm 宽的梳子可加 0.5 μg 的 DNA 量，加样量的多少根据加样孔的巨细及 DNA 片段的数量和巨细而定。

  当加样孔大时，样品上样量应相应加大，否则会形成条带浅乃至辨认不清；反之则应恰当减少加样量，由于上样量过多会形成加样孔超载，因而导致拖尾或弥散，关于较大的 DNA 片段，此现象更显着。

  5、DNA 样品：样本中盐浓度会影响 DNA 搬迁率，平行对照样品应运用相同的缓冲条件以消除这种影响。

  6、DNA 搬迁率：取决于琼脂糖凝胶的浓度、搬迁分子的形状及巨细。选用不一样浓度的凝胶有或许分辩规模广泛的 DNA 分子，制备琼脂糖凝胶可根据 DNA 分子的规模来决议凝胶的浓度。小片段 DNA 的检测应选用聚丙烯酰胺凝胶电泳，以进步分辩率。

  丁香试验做更优质的试验内容资讯离不开各位科研 er 的支撑和重视！假如你是师兄师姐，也欢迎把本篇文章共享给师弟师妹们！

  丁香试验联合美天旎举行的「细胞制备分选」答题挑战赛开端啦！每日打卡一个细胞制备分选基础知识，就能额定取得可回弹解压包~赶忙来答题吧！