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电泳仪 - 实验方法 - 丁香通

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电泳仪 - 实验方法 - 丁香通

时间: 2024-03-12 10:10:34 |   作者: 爱游戏官网

将两个电极插在电解溶液中,通上直流电,带电颗粒在电场力作用下向所带电荷相反的电极泳动,即正离子则

详细介绍


  将两个电极插在电解溶液中,通上直流电,带电颗粒在电场力作用下向所带电荷相反的电极泳动,即正离子则向负极移动,而负离子向正极移动,此现状就是我们熟悉的电泳现象,也称“电泳”。能够给电泳装置提供一定电压、电流条件的稳定直流电流装置称“电泳仪”。许多重要的生物分子如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都含有可电离基团,在非等电点条件下均带有电荷,在电场力的作用下,它们将向着与其所带电荷相反的电极移动。电泳技术是利用样品中各种分子带电性质、分子大小、形状等的差异,在电场中的迁移速度不同,从而对样品分子进行分离、鉴定、纯化和制备的一种综合技术。目前电泳技术已大范围的应用于生物化学、分子生物学、药学、食品、工业、农业、卫生及环保等学科。电泳仪包括电源和电泳槽两部分。

  电泳槽大多数都用在盛放缓冲液、电极、滤纸等。一般用有机玻璃或玻璃胶制成,其种类很多,有圆盘电泳槽、垂直电泳槽(单、双)、多用途电泳槽、薄层等电点聚焦电泳槽、琼脂糖水平电泳槽、微型垂直电泳槽、微型卧式多用途电泳槽等,可根据实验要求选择。

  1. 普通直流电源这种电源不稳压也不稳流,它是直接通过整流电路把交流电源变为直流电源。

  2. 稳压直流电源相对普通电源,当交流电电压或负载电流发生明显的变化时,整流器输出电压也会随之发生明显的变化。但许多电子设备、精密仪器需要直流电压,所以一定要采用直流稳压电路。直流稳压电路与整流器、滤波器组合在一起构成直流稳压电源。通常用于对稳压、稳流不太高的电泳中。

  3. 稳流稳压电源一般在电泳过程中,最好能维持电压或电流的稳定。在某些情况下稳流比稳压使用要多一些。电流不变,液体蒸发就少,在室温变化较大时用稳流得到的结果重复性较好。在电压高时,泳动较快,短时间可得到清楚的电泳谱。电压高易产生大量的热,因蒸发严重等因素使移距缩短。故应根据电泳的要求选择正真适合的电源。

  4.三恒(恒压、恒流、恒功率)电源通常电泳仪仅有两个参数即电压和电流,现已出现了电压、电流、功率可控的三恒电泳仪。这种电泳仪大幅度的提升了分离分析水平。

  现以常用于蛋白、核酸电泳的普通稳压稳流EPS100型电泳仪为例介绍其使用方法。

  3.将黑红两种颜色的电极线对应插入仪器输出插口,并与电泳槽相对应插口连接,一定要正极接正极,负极接负极 (假如发现电极插头与插口之间接触较松,可以用小改锥将插头的簧片向外拨一下)。

  6. 按“功能键/设定键”选择电压、电流、时间,配合“上调”、“下调”电压调节旋钮或电流调节旋钮调到所需电压或电流。如果不熟悉如何预置电压电流,可以先确定是恒压输出,还是恒流输出。如果是恒流输出,则将电流调节为0,将电压调至最大,然后开机,此时缓缓调节电流调节旋钮,直到所需电流值。如果是恒压输出,则将电压调为0,将电流调为最大,然后开机,缓缓调节电压旋钮至所需电压值。注意,电源在任何情况下只能稳定一种参数(电压或电流),电压电流之间的关系符合欧姆定律。

  7.按下“停止/输出键”,电泳仪开始工作,如要中途中断电泳,再按下“停止/输出键”。

  2. 电泳仪与电泳槽联好后,一定要先倒上电解液,上好样品后,再设定条件通电电泳。

  3. 调电流、电压时,不要超出额定范围,在电泳过程中,电泳装置如有异常发热,立即关闭电泳仪。

  4. 在电泳过程中不能裸手接触电极、电解液,电泳完毕后一定要拔出电极,关闭总电源。

  5. 常用电泳仪一般均有两组并联输出插口,可以同时接两个电泳槽,但要求这两组电流之和不超过仪器的最大值。此时最好采用稳压输出,以减少两槽之间的相互影响。

  6. 如发现只有电压显示而电流输出为零,应检查输出端到电泳槽之间是不是断路。

  7.使用中发现不正常的情况应立即关机,如果是仪器故障,应请修东西的人负责检修。

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